一、产品概述
呕吐毒素(Vomitoxin),是一种单端孢霉烯族毒素,主要由禾谷镰刀菌和粉红镰刀菌产生,化学名称为脱氧腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),容易存在于各种谷物类粮食及加工产品中,污染水平一般为mg/kg(ppm)级。DON具有很强的细胞毒性。人误食DON含量高的食物后,容易导致急性中毒头昏、腹胀、恶心、呕吐,以及白细胞缺乏症。
目前通常采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对谷物(小米、玉米、大麦等)及其制品(蛋糕、饼干、面包等)中的呕吐毒素含量进行快速定量检测。
本试剂盒【产品代码:MYT03196】是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品,能最大限度地减少操作误差并降低工作强度。
二、产品原理
呕吐毒素检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被呕吐毒素抗原,样本中呕吐毒素和此抗原竞争呕吐毒素抗体,同时呕吐毒素抗体与酶标二抗相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与其含有的呕吐毒素成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中呕吐毒素的含量。
检测依据:GB5009.111-2016食品安全国家标准 食品安全脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定;GB13078-2017饲料卫生标准;GB 2761-2017 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量。
三、产品性能参数
1.操作流程
适当稀释 加样(90s) 37℃,20min
样品提取—————→试剂准备—————→免疫反应—————→
37℃,15min 目测、仪器法
显色反应—————→结果判定—————→计算含量
2.技术参数
1)最低检出浓度:12.5ppb;
2)反应时间:35min;
3)回收率:80%-110%;
4)交叉反应:<20%;
5)标准曲线范围:12.5~200ppb;
6)重复性:条内CV%<8%,条间CV%<12%。
四、仪器设备配置
1.设备:
---微量移液器,量程20~200µL、100-1000µL(建议尽可能选配8道或12道微量移液器)
---酶标仪(带450nm波长)
---恒温培养箱
---小型粉碎机或均质机
---离心机、振荡器或超声仪
---分析天平、冰箱
---玻璃器皿:锥形瓶、烧杯、移液管、滤纸、漏斗等
2.试剂:
---蒸馏水
---甲醇(分析纯)
---正已烷或石油醚(分析纯)
---氢氧化钠(分析纯)
五、试剂盒组成:
试剂名称 | 试剂盒规格 |
96T | |
DON包被反应板 | 96 孔 |
DON标准溶液 (0、12.5、25、50、100、200ppb) | 1 套 |
DON抗体溶液 | 2瓶 |
酶标二抗溶液 | 2瓶 |
底物液 | 1 瓶 |
显色液 | 1 瓶 |
终止液 | 1瓶 |
浓缩洗涤液(×10) | 1 瓶 |
样品稀释液 | 1 套 |
酶标板框架 | 1 只 |
一次性滴管 | 2支 |
说明书 | 1 份 |
六、贮藏条件及保存期
1.贮存条件:保存试剂盒于2~8℃,忌0℃以下冻存。
2.保存期:该产品有效期为9个月,批号及有效期见试剂盒侧面。